Introduction
随着消费者对化妆品的认知程度不断升高, 安全性和功效性逐渐成为关注的重点。由于目前市场上大部分宣称有助于皮肤美白、增白的化妆品与宣称用于减轻皮肤表皮色素沉着的化妆品作用机理一致, 因此为控制美白化妆品的安全风险, 国家食品药品监督管理总局将其纳入祛斑类特殊用途化妆品实施严格管理, 同时也对美白功效宣称和评价提出了更高的要求。现阶段美白祛斑功效评价方法大体可分为四类, 分别是用体外酶抑制法(Fu et al., 2003)、细胞生物学法(Tu et al., 2006)、动物实验法(Choi et al., 2004)和人体试用实验法(Stamatas et al., 2004)等, 其中生物化学法和细胞生物学法多用于美白活性添加剂的体外快速筛选, 而美白化妆品的功效评价则主要采用动物实验法和人体试用实验法。
本研究通过人体试用实验法获得受试者皮肤定量参数来对市售四款美白类化妆品进行功效评价。
Methods
1. Materials
2) Test instrument
皮肤黑色素和血红素测试仪(Mexameter® MX18 Courage+ Khazaka electronic GmbH, Germany), 测试皮肤的两种主要色基黑色素和血红素, 其输出结果以黑色素指数(melanin index, MI)值和红斑指数(erythema index, EI)表示。
多功能皮肤测试仪及色度测试探头 (Multiprobe Adapter MPA 9, Courage+Khazaka electronic GmbH, Germany), 收集皮肤表面垂直的反射光, 进行三色分析, 测量结果用国际照明委员会(Commission Internationale del´Eclairage,CIE)的L*a*b*系统表示。
2. Methods
2) Test index
皮肤黑色素含量MI值:MI值表征黑素指数, 其原理为特定波长下 (568nm, 660nm和880nm)的光, 照在人体皮肤上的反射量, 以此确定皮肤中黑色素含量, MI的数值范围为0-999, 数值越大皮肤黑色素含量越高。 皮肤亮度L*值:L*为白平衡, 值越大, 颜色越偏向白色, 反之, 偏向黑色。
ITA°值:ITA°值为皮肤个体类型角, 是与L*和b*(b*为蓝黄色度, +b为黄, -b为蓝)相关的表征皮肤明亮度的数值。 ITA°值越大, 皮肤越明亮,反之, 皮肤越暗沉(Mayre et al., 1997; Park et al., 1999; Rubegni et al., 1997; Wee et al., 1997)。
4) Test method
依据随机排序原则, 将受试者左、右前臂作为实验区, 并标记出的4处独立的测试区, 方式为循环标记;受试者按要求使用产品, 每日早晚各使用一次, 使用周期为8周。在测试周期内,受试者不改变日常清洁习惯, 但受试部位不使用其它任何化妆品(Liu et al., 2000)。
Results and Discussion
Conclusion
L*a*b*色度空间系统分析法是三色分析法中的一种重要方法(Weatherall & Coombs, 1992 ; Andreassi & Flori, 1995), 是国际照明委员会(CIE)规定的色度系统。近年来, 国外遍采用L*a*b*色度空间系统测量健康人体皮肤色度在使用产品前后的变化, 根据皮肤色度变化评价美白化合物的功效。它包括不同的色度空间系统, 如Munsell、L*C*h、 XYZ(Yxy)、L*a*b* 等色度系统, 其中L*a*b*色度系统应用最为广泛, L* 代表黑白度, a* 代表红绿色度, b* 代表蓝黄色度, 三者的综合评价能够反映皮肤色度的变化。该法表明了颜色在色度空间的位置, 使色度变化可以以数值的形式表达, 量化比较准确, 因而在以肤色变化为观察终点的人体化妆品功效评价中, L*a*b*色度空间系统得到了普遍应用(Cheng et al., 2006)。
L*a*b*色度系统反映的是皮肤颜色的色彩变化,它不仅能反映肤色的黑白变化,也能反映皮肤的变红、变黄等(Li et al., 2003), 而其中L*值为白平衡, 可直接表征皮肤的“黑”与“白”, 其值越大, 皮肤颜色越偏向白色, 反之, 偏向黑色。
皮肤中含有黑素细胞, 可产生黑素, 黑素是皮肤颜色最主要的决定因素, 当黑色素过速增长和分布不均时, 就会造成局部皮肤过黑及色素沉着。皮肤黑色素含量的测定可使用Mexameter® MX18 测定, 该种图像分析技术是基于光谱吸收的原理, 通过特定波长的光照在人体皮肤上的反射量来确定皮肤中黑色素含量。从皮肤病学领域看来, 显微镜照相技术和计算机处理系统的结合能够对色素沉着的皮肤颜色进行扫描并进行色度定量, 检测皮肤颜色的变化(Takiwaki et al., 1994; Kawada et al., 2002), 以此来评价皮肤颜色的变化, 包括在人体上进行的色素沉着抑制试验等(Cheng et al., 2006)。
采用随机循环标记方式, 对四款市售美白产品进行人体试用试验,通过对比人体曲臂内侧皮肤黑色素含量和皮肤色度的前后变化, 应用SigmaStat 3.5进行统计学分析, 来评价美白化妆品的功效。
由于温度、湿度和阳光紫外线对化妆品功效评价, 尤其是美白评价影响相当大, 所以按照国际上的美白功效测试和评价方法要求, 实验室条件必须为恒温恒湿的测试环境,保持温度22士1 ℃, 湿度50士5%。进行美白测试的实验室条件均符合以上要求。在评价过程中, 实验操作以及实验条件均是严格按照国际上化妆品功效评价实验要求, 在恒温恒湿的环境下, 采用国外先进仪器和技术, 对美白化妆品的功效进行检测和评价。另外美白化妆品功效评价结果会受志愿者日晒程度等因素影响, 因此避免选取进行户外工作和在实验期间有户外活动计划的志愿者, 尽量减少由于外界因素对实验结果的影响(Cheng et al., 2006)。
化妆品美白功效性评价结果表明, 在实验周期第0周到第8周的时间范围内, 测试组中样品1、样品2和样品3的受试部位, 皮肤黑色素含量MI值、皮肤色度L*值和ITA°值均在第8周时, 有明显的改善效果(p<.05), 由此能说明此3款美白化妆品具有良好的美白效果。而通过对皮肤黑色素含量MI值、皮肤色度L*值和ITA°值三种指标的数据分析, 均能表征皮肤颜色变化的情况, 即说明皮肤黑色素含量MI值、皮肤色度L*值和ITA°值可作为评判化妆品美白功效评价的手段。